定量PCR中,用内参基因进行标准化,为什么要用几何平均,

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/02 10:54:46
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因为内参和目标基因的扩增效率有可能不一样,所以CT值不能直接相减.只能是内参间先算出相对量,目的基因也算出相对量(倍数),然后在用目的基因的倍数除以内参的倍数.

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定量PCR中,用内参基因进行标准化,为什么要用几何平均, 定量PCR数据分析中,标准化和归一化是怎样进行的 用内参基因标准化时为什么要用几何平均 标准化和归一化是一样的吗,还需要有其他的校正吗 求助水稻的actin 内参基因引物想用水稻的内参做荧光定量PCR,有哪位大侠有水稻内参Actin的引物么?在下感激不尽! 还想再向您请教下 关于荧光定量PCR 相对定量内参基因的选择,如果我想用18SrRNA,我该怎么得到这个内参呢 rp49基因是什么基因,很多做半定量PCR的用这个基因做内参,想了解下该基因是否是rRNA 相对荧光定量PCR中,2(-ΔΔCt)是怎么回事?比如我用T基因为内参,得到了耐药菌A、B、C基因的Ct值的均值和敏感菌的A、B、C基因的Ct值的均值,怎么比较耐药株和敏感株这三个基因表达量有没有 荧光定量PCR引物设计本人在做荧光定量PCR之前,先用Primer 3.0设计了目的基因的引物,用于半定量PCR,而且也把引物放入NCBI中进行了blast比对,得到引物为特异性引物,半定量PCR效果也跟预期一样,电 我准备做定量PCR,需要检测的基因大约有10个左右,请问我需要多少个内参基因?只用1个内参行不行?我们实验室经常用18S和β-actin两个内参,是不是内参越多越好?怎样去选择最合适的内参基因呢 我要做荧光定量PCR,测细胞因子mRNA,要测三种因子,是否是把三种引物和内参基因引物分别加入到四个体系中 请问荧光定量PCR进行相对定量时,若是目的基因和内参基因扩增效率不一致,为什么会导致结果的不准确?那么怎么平衡扩增效率呢? PCR 内参 跑胶我跑半定量PCR的时候,内参出来的亮度不一致,有的 泳道很亮,有的暗一些,那我这张图还可以用吗,因为有人说内参的亮度应该保持一致?不是只要比目的基因和内参的灰度值来比较 实时定量pcr内参以及相对标准曲线的问题我最近在做pcr,不过身边没有熟练的人,很多基本问题搞不清楚,我用SYBR Green 进行实时定量pcr,看到网上说需要用内参,可是用内参的话,是不是需要用不 相对定量PCR是用目的基因拷贝数/内参拷贝数,还是用2-ΔΔCt值去分析?为什么有的文献是直接用前者? 我是新手,在相对定量PCR中,采用2 -△△Ct 我在文库中看到,有两个假设的前提,一是目的基因与内参基因扩增效率相同;二是目的基因与内参基因扩增效率相同等于1;两个假设成立才能用这种 荧光定量pcr标准曲线中的扩增效率太高怎么办做荧光定量标准曲线,同时做内参β-actin和自己的基因SA,结果内参相关系数为1.000,扩增效率为99.7%,SA相关系数为0.990,扩增效率为137.3%,初始模板浓度 半定量rt pcr内参和目的基因的引物加的量相同吗,能否放在同一管中跑PCR 请问,GAPDH作为RT-PCR内参的原理是什么呀?我知道为什用它做内参了,就是不清楚怎么用它, 荧光定量PCR熔解曲线本人菜鸟,刚接触荧光定量PCR,有一个问题,不知道溶解曲线中为什么有那么多线,每条线是不是代表一个循环?如果是的话为什么同时扩增的两个基因,内参基因溶解曲线图上