载体是pcdna3.1,感受态可以用哪种?有没有特别的限制?

载体是pcdna3.1,感受态可以用哪种?有没有特别的限制? 如何向PCDNA3.1 载体上加入FLAG标签? 载体连接的时候PCR仪16度也可以啊?温度高点行不行啊?那后来的感受态细胞是TOP10,可以么? 基因复制出来了要放到哪里去表达?感受态细胞吗?基因复制出来了要表达怎么办?放到哪里表达?是感受态细胞?有学长留下来的表达载体可以继续使用吗? 使用pcDNA3.1载体转化大肠杆菌后,如何进行筛选?如题：追加20-30分使用pcDNA3.1载体转化大肠杆菌后,如何进行筛选（筛选转化后的大肠杆菌）? 如何扩增及提取表达载体?是不是导入感受态细胞培养,然后直接提取质粒就可以?怎么确是我的表达载体质粒如何扩增及提取表达载体?是不是导入感受态细胞培养,然后直接提取质粒就可以?怎 pcdna3.1作为载体的重组质粒转入大肠杆菌怎么检测筛选酶切了hindⅢ和EcoRⅠ, 质粒转染细胞不表达的问题~想研究某跨膜蛋白,构建真核表达质粒（构建了多种,载体有PCDNA3.1-FLAG,PCDNA3,1-V5,PCMV-5'端MYC,PCDNA3-5'FLAG,PCDNA3-5'HA）,转染始终不表达,细胞换过293T,AD293,COS1,COS7等,转染操 本人实验,现在手上有pCDNA3.1-EGFP载体,现在想在载体上插入目的基因PTEN片段,应该怎么做? pcDNA3.1和pcDNA3 有什么区别么? 适合 pUC18 载体的感受态细胞有哪些?T克隆时用的JM109 感受态细胞可以用DH5a代替不? cos-7细胞是真核还是原核细胞?如果要转染入这个细胞的话,构建的质粒必须是pcDNA这个载体吗?另外请问这个 pcDNA3.1 /CT-GFP-TOPO是什么意思?如何翻译?如果要转染进COS-7细胞的话如何选择表达载体 请问适用于噬菌粒载体pUC119转化的感受态细胞都有哪些?我知道JM109可以,TOP10可以吗? 用pcDNA3.1(+)作为表达载体,设计PCR引物时怎么能保正不移码?起始密码子前的碱基个数应该是多少? 用pCDNA3.1+质粒,设计单载体单启动子,共表达抗体轻重链实验方案如题,这就是老板布置的任务,还说有一些方法就是可以单启动子共表达轻重链.我看过一些嵌合抗体构建的文献,基本上都是用的 pcDNA3.1的多克隆酶切位点有哪些 用pcDNA3.1在哺乳动物细胞里表达蛋白,从转染开始算,多长时间可以表达出目的蛋白呢~ 我在构建质粒：载体大小为9kb,目的片段为3.4kb,连接产物可以用普通的热击方法转化感受态Ecoli.DH5a吗?