DNA建库时末端修复后要加A,它是具体怎么做到只加一个A的?(注意是具体)另外,DNA打断机在片段长度的具体打断时,打断长度跟打断频率、打断时间、打断强度等之间有没定性的关系,还是说根

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/02 18:07:25
DNA建库时末端修复后要加A,它是具体怎么做到只加一个A的?(注意是具体)另外,DNA打断机在片段长度的具体打断时,打断长度跟打断频率、打断时间、打断强度等之间有没定性的关系,还是说根

DNA建库时末端修复后要加A,它是具体怎么做到只加一个A的?(注意是具体)另外,DNA打断机在片段长度的具体打断时,打断长度跟打断频率、打断时间、打断强度等之间有没定性的关系,还是说根
DNA建库时末端修复后要加A,它是具体怎么做到只加一个A的?(注意是具体)
另外,DNA打断机在片段长度的具体打断时,打断长度跟打断频率、打断时间、打断强度等之间有没定性的关系,还是说根据经验来判断?

DNA建库时末端修复后要加A,它是具体怎么做到只加一个A的?(注意是具体)另外,DNA打断机在片段长度的具体打断时,打断长度跟打断频率、打断时间、打断强度等之间有没定性的关系,还是说根
Taq聚合酶同时具有的末端连接酶的功能,PCR反应时在每条PCR扩增产物的3`端自动添加一个3`-A突出端.只有用经过特殊处理的具有3’-T突出末端的DNA片断才能通过T/A配对进行连接.
所以TA克隆不需使用含限制酶序列的引物,不需将PCR产物进行优化,不需把PCR产物做平端处理(Invitrogen另有平端载体供高确限度酶克隆).不需在PCR扩增产物上加接头,即可直接进行克隆.
可以用超声波进行DNA的打断!

现在有很多商品聚合酶都会在所合成的DNA链末尾加一个A,这样就可以与T载体末尾突出的T互补,也就是现在常用的TA克隆。
打断DNA典型的情况下在1500r/min转速下30min可将DNA剪切成8Kb的分子群体