作业帮Affinity pull down assay (DAPA)的实验原理?我正在看的文献里方法上是这样说的，先设计DNA probe，然后获得一个400bp的probe，再hybridized to 链霉亲和素--coated magnetic beads。再把这个跟细胞核提取物孵育
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/04/28 02:11:51
Affinity pull down assay (DAPA)的实验原理?我正在看的文献里方法上是这样说的，先设计DNA probe，然后获得一个400bp的probe，再hybridized to 链霉亲和素--coated magnetic beads。再把这个跟细胞核提取物孵育
Affinity pull down assay (DAPA)的实验原理?
我正在看的文献里方法上是这样说的，先设计DNA probe，然后获得一个400bp的probe，再hybridized to 链霉亲和素--coated magnetic beads。
再把这个跟细胞核提取物孵育，然后The probes were then immobilized on a magnetic stand,and unbound proteins were removed。
谁能简单介绍下原理
Affinity pull down assay (DAPA)的实验原理?我正在看的文献里方法上是这样说的，先设计DNA probe，然后获得一个400bp的probe，再hybridized to 链霉亲和素--coated magnetic beads。再把这个跟细胞核提取物孵育
你基本都说出来了.
DNA probe 和链霉亲和素杂交在一起,而链霉亲和素能够和magnetic beads亲和结合,所以经过孵育之后,再将细胞核提取物流过beads,DNA probe是400bp的,所以和目的DNA结合力相当高,就将目的DNA留在beads里面,其他不能结合的就都被去除.最后,在用专门的洗脱液（对应于链霉亲和素）进行洗脱,得到目的DNA.
你可以看看 GST-tag ,his- tag,等等pull down assay 的实验原理,虽然这些是针对蛋白的,但是原理一样,很简单的,记得做好control就行了.
你这明显是在扯吧，什么DNA和目的DNA结合，还目的DNA留在beads里面，不懂不要乱回答，语无伦次，误人子弟。就是拿个DNA探针挂在beads上，然后和核抽提物共孵育，寻找可以与该探针结合的蛋白。beads的作用就是DNA探针的把手，不然你怎么操作呢，一洗不就全没了。最后洗完了质谱或者western检测。真服了这个满意回答了，完全是bullshit...
全部展开
你这明显是在扯吧，什么DNA和目的DNA结合，还目的DNA留在beads里面，不懂不要乱回答，语无伦次，误人子弟。就是拿个DNA探针挂在beads上，然后和核抽提物共孵育，寻找可以与该探针结合的蛋白。beads的作用就是DNA探针的把手，不然你怎么操作呢，一洗不就全没了。最后洗完了质谱或者western检测。真服了这个满意回答了，完全是bullshit
收起