用western检测真核表达的带有flag标签的融合蛋白时,能用目的蛋白本身的抗体进行检测,但用flag抗体确无法在确保western条件没有问题的情况下,我在检测N端带有flag标签的融合蛋白时,用目的

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/27 22:25:06
用western检测真核表达的带有flag标签的融合蛋白时,能用目的蛋白本身的抗体进行检测,但用flag抗体确无法在确保western条件没有问题的情况下,我在检测N端带有flag标签的融合蛋白时,用目的

用western检测真核表达的带有flag标签的融合蛋白时,能用目的蛋白本身的抗体进行检测,但用flag抗体确无法在确保western条件没有问题的情况下,我在检测N端带有flag标签的融合蛋白时,用目的
用western检测真核表达的带有flag标签的融合蛋白时,能用目的蛋白本身的抗体进行检测,但用flag抗体确无法
在确保western条件没有问题的情况下,我在检测N端带有flag标签的融合蛋白时,用目的蛋白本身的抗体能检测到蛋白的表达,而用抗flag的抗体却无法检测到目的大小的条带,flag标签是载体自带的,抗体也是经验证无误的,我感到很困惑的是,为什么用flag的抗体检测不到目的条带呢?

用western检测真核表达的带有flag标签的融合蛋白时,能用目的蛋白本身的抗体进行检测,但用flag抗体确无法在确保western条件没有问题的情况下,我在检测N端带有flag标签的融合蛋白时,用目的
看你的flag抗体是否有问题,我是做抗体生产的,原来开发flag抗体时就会对其进行C端、N端、M端的Qc检测,正常情况下三端都需要有识别,我担心你的抗flag抗体有可能不识别N端,还有一种可能就是你的融合蛋白不含flag标签.你可以从这两个方面入手解决,至于你运用什么实验设计,我想你应该完全没问题.预祝你能够顺利解决此疑问.

做western时候 导致失败的因素太多了 楼主能再说的详细些吗?站内吧

你能确定你的FLAG标签管用吗?如果FLAG标签失效了,什么都白搭。

用western检测真核表达的带有flag标签的融合蛋白时,能用目的蛋白本身的抗体进行检测,但用flag抗体确无法在确保western条件没有问题的情况下,我在检测N端带有flag标签的融合蛋白时,用目的 检测基因的表达量是用western还是PCR 空调的FLA(A)是什么意思? Western印迹杂交技术本身的特点只能检测.A. 基因表达B. 基因扩增C. 基因突变D. DNA多态E. RNA分子的大小和表达量 我要用fas bcl-2 p53 的兔抗鼠多克隆抗体检测他们的western blotting表达,二抗用HRP-羊抗兔Ig-G,请问用什么抗体稀释液好?配方是什么? 请教caspase-3的检测方法问题看到过有关caspase-3的检测方法:(1)免疫细胞化学检测caspase-3蛋白的表达,用悬浮的细胞;(2)western blot 理想结果:caspase-3有32KD的条带外,还出现了20KD和10KD大 我要用western检测一种细胞系中分泌蛋白的表达,eg:细胞因子,是检测培养液中的蛋白还是细胞抽提物种的呢我个人觉得分泌蛋白是通过分泌到细胞外之后产生作用的,那就应该检测培养液中的蛋 为什么检测某种蛋白的表达都用免疫组化和原位杂交l呢看每一篇文献基本上都是这两种方法联合使用,做原位杂交(好像一般都是用western blotting)的目的是什么呢,检测表达的多少(能定量吗 如果某种蛋白在细胞中低表达,用流式细胞术能不能检测到?不需要定量,只需要能检测到!流式细胞仪检查蛋白表达的敏感度跟western blot比怎样? 如何用western来检测基因的磷酸化水平? 做western之前怎样确定检测蛋白的分子量, 动物实验,Western blotting和免疫组化,选择哪个检测蛋白表达? 请问光端机的FLA指示灯是什么意思 真核表达分泌型蛋白,有信号肽序列的质粒转染293T细胞,western鉴定,那么转染之后上清和细胞怎样收样?主要是样品的收集问题,我做western阳性对照都出来了,但是待检样做不出来,细胞核上清要分 做western,一个关于检测mTor通路升高降低的,为啥用S6k做抗体,内参为啥用B-action 概率题,七.已知有10%的人带有某种病毒,随机选一个人,用一种检测方法检测他是否带有病毒,正确率为90%,(1)检测认为他带有病毒的概率;(2)若检测认为他带有病毒,求他确实带有病毒的概 当用qRT-PCR验证了目的基因的表达后 还有必要用western做验证吗 已知蛋白A为为一个蛋白激酶,与蛋白B共同表达在细胞内后,用western blotting检测发现蛋白B在SDS-page胶中的迁移速率明显变慢,(1)解释可能的原因,设计实验证明蛋白A是确实的蛋白B在生理条